破解合成难题，兆维科技加速双靶小核酸药物临床转化！

近年来，双靶点寡核苷酸药物凭借其协同作用、避免联用疗法的优势，成为全球制药领域最热门的赛道之一。然而，尽管其前景广阔，这类药物的合成和生产仍面临多重技术瓶颈，成为阻碍管线进展的关键障碍。

当前，全球众多药企正紧锣密鼓地布局双靶点寡核苷酸药物领域，推动药物开发迈向临床应用。特别是双靶点siRNA（小干扰RNA）药物，凭借其“同时沉默多个关键致病基因”的突破性优势，成为克服单靶点干预局限性的关键解决方案。近期行业动态充分印证了这一趋势：

9月2日，RNAi先驱John Maraganore创立的Corsera Health宣布其双靶点siRNA药物计划于2025年底前进入临床。该药物同时靶向PCSK9和AGT，用于治疗高血脂症。

紧随其后，9月17日迈威生物通过一个临床前双靶siRNA管线的“NewCo模式”成功出海，与Kalexo达成潜在总额高达10亿美元的合作。。

同期在第18届国际IgA肾病研讨会上，前沿生物首次发布具有全球首创潜力的双靶siRNA药物的临床前数据。该药物对双靶点的抑制率高达约95%，且有望实现每4-6个月给药一次的突破性给药周期。

而就在最近，10月21日，圣诺医药自主研发的双靶点siRNA药物SA1211正式获得NMPA临床批件，成为全球首个进入临床阶段的用于治疗慢性乙肝（HBV）的双靶点siRNA管线。

上述案例所反映的热度，源于双靶点siRNA独特设计带来的优势。传统siRNA由互补的正义链和反义链组成（图1，A），而双靶点siRNA通过连接子将两个siRNA单元串联（图1，B），形成一个整体。其中，反义链a和反义链b可设计靶向不同的mRNA靶点，从而实现双重靶向（dual-targeting）。

图1. 传统siRNA（A）和双靶点siRNA（B）结构示意图

这种双靶点设计带来以下治疗优势：

1. 协同增效，突破单靶点局限。许多疾病并非由单一因素驱动。双靶点设计能够实现对疾病过程中多个通路进行协同干预。以时安生物的SA1211为例，这款靶向HBV的双靶点siRNA同时靶向HBX基因（HBV X蛋白）和PD-L1基因（程序性死亡配体1）。抑制HBX mRNA和PD-L1 mRNA分别可以阻断病毒复制，同时“唤醒”免疫系统，减少HBV免疫逃逸。
2. 避免联用疗法，降低剂量相关毒性。相较于使用两种不同的siRNA联用，双靶点siRNA的总给药剂量更低，从而避免了高剂量带来的毒性，提高了安全性。
3. 体内暴露可控，避免双峰现象。从PK（药代动力学）角度看，两个独立的siRNA其吸收和清除速率不同，会导致两种药物的血药浓度曲线出现“双峰”现象。而作为单个分子，双靶点siRNA则不存在这一现象，能够实现对两个靶点的同步沉默，达到更好的协同增效。

双靶点siRNA在带来上述优势的同时，也给合成带来了显著挑战，成为管线进展的关键阻碍：

1. 正义链长度翻倍。由于双靶点siRNA的正义链需要与两条反义链互补，其长度达到40nt左右，是传统siRNA正义链的两倍。因此，固相合成所需偶联步数更多，累积收率显著降低。
2. 额外连接子（Linker）修饰。不同于传统siRNA，正义链还需要引入linker修饰。以TEG（四乙二醇）linker为例，如果使用TEG亚磷酰胺进行合成，不仅会增加偶联步骤的数量，其带来的空间位阻也会进一步降低合成效率。
3. 大规模生产。Corsera Health近期公布其针对高血脂症双靶点siRNA药物临床计划，标志着双靶siRNA向常见代谢疾病领域进军。这意味着双靶siRNA在未来会有更广的用户覆盖和更大的规模化生产需求。考虑到上述的合成门槛，双靶siRNA的大规模生产将成为一个重大挑战。

作为全球领先的基因单体供应商，上海兆维科技深耕核酸领域近30年。在不断完善现有固相合成平台的同时，我们正开创性地推出化学酶法连接合成平台，以助力双靶点siRNA的产业化。

固相合成平台。上海兆维科技凭借核酸全产业链优势，从上游原材料（如亚磷酰胺/GalNAc/NTPs）到下游纯化、制剂，全程进行质量控制，确保提供高质量、低成本、稳定的核酸产品。此外，上海兆维科技固相合成平台配备行业领先的1800mmol大型合成仪，GMP级别生产能力达到公斤级。

图2. 双靶点siRNA的化学酶法连接合成策略。
(A) 采用固相合成获得较短片段。
(B) 片段杂交形成连接位点。
(C) 使用连接酶连接片段，形成完整的双靶点siRNA。

化学酶法连接合成平台。图2展示了鸿日最新的化学酶法连接合成平台。该平台规避了一次性合成完整长正义链的挑战，而是首先通过固相合成获得多个较短片段（图2，A），确保合成质量和收率。随后，利用连接酶（ligase）将这些片段连接（ligation）起来，形成完整的双靶点siRNA（图2，C）。该合成策略具有以下特点：

1. 更高的产率。通过缩短固相合成的长度，保障了每个短片段的纯度和产率，特别是对带有连接子（Linker）修饰的正义链2（图2，A）。偶联步数的减少也相应降低了试剂成本。
2. 一锅法酶连接。酶法连接反应无需分步操作，采用一锅法将各片段转化为完整的双链siRNA产物。
3. 更简易的纯化方案。通常情况下，合成每个短片段后需要层析纯化（图2，A）。上海兆维科技的化学酶法连接平台能够采用连接后纯化方案，省去了固相合成后的纯化步骤，从而降低成本并提升产率。

目前，上海兆维科技的双平台已成功支持多个项目走向临床阶段。其中包括助力时安生物全球首款单分子双靶siRNA药物获批临床，以及鼎乐新为全球首款酶法工艺siRNA药物获批临床！

双靶点寡核苷酸药物正开启创新疗法的新篇章。上海兆维科技作为深耕寡核苷酸CDMO领域的先行者，采用“化学酶法连接 + 固相合成”的双平台技术矩阵，破解合成效率、规模化生产与纯度控制的核心难题。

未来，上海兆维科技（Hongene Biotech）将持续迭代技术平台，为全球创新药企提供更高效、更可靠的CDMO服务，助力其加速双靶点寡核苷酸药物的研发与商业化进程，早日将更多突破性疗法带给患者。